RemyEV

エクソソームは、幹細胞が分泌する小胞ですが、幹細胞の培養条件によって内包される情報や分泌量に大きな違いがあります。

RemyBioは優れた無血清培地を構築することで、幹細胞の培養方式としては難しいローリングボトルでの幹細胞培養を行っています。このローリングボトルによる培養は、エクソソームやサイトカインの分泌を促し、通常のフラスコなどの培養と比較して、有効成分を大量に含む幹細胞培養液の製造を可能にしています。

また、この資料にあるエクソソームのデータは、この培養条件によって分泌されたエクソソームによるものであり、別の培養条件で分泌されたエクソソームに、同様の効果があるかは確認されていません。

RemyStemの培養条件で幹細胞から分泌されたエクソソームは、紫外線によって光老化した線維芽細胞を若返らせることが、実験によって検証されています。

培養している線維芽細胞（❶ Young）に紫外線を照射することで、光老化を誘導します（❷ Negative）。老化した線維芽細胞は、肥大・扁平化し、細胞分裂を停止します。このとき細胞内では細胞老化のマーカー、SA-β-ガラクトシダーゼが生成されています（Negativeの青く染色された部分）。この確実に老化した線維芽細胞にRemyStemを添加するとSA-β-ガラクトシダーゼが減少し、線維芽細胞は細胞分裂を開始します（❸RemyStem）。

RemyStemはサイトカインを始めとした様々な機能性成分を含有しています。この実験で一度老化した線維芽細胞を若返らせた成分が何であるかを検証するため、様々な成分を阻害したとき、RemyStemに含まれるエクソソームのmiRNAを阻害したとき、 SA-β-ガラクトシダーゼが減少しませんでした（❹ miRNA Inhibitor）。このことから、老化した線維芽細胞を若返らせたリバースエイジング成分は、RemyStemに含まれるエクソソームであることが確認されました。

ステムセル・エクソソームのヒト角質細胞HaCaT の増殖効果をWST-1 assay で確認したところ、ステムセル・エクソソームは角質細胞の増殖を陽性対照群である血清（FBS）処理群と同じくらい有意に増加させました。肌バリアの強化などの効果を期待することができます。

ステムセル・エクソソームによるヒト角質細胞HaCaT の遊走誘導効果をSingle Cell Tracking System で確認したところ、ステムセル・エクソソームは角質細胞の移動速度を血清対照群と比較して有意に増加させました。皮膚の再生などの肌バリアの改善が期待できます。

ヒト角質細胞にH2O2を処理し、人為的なROS暴露モデルを作成し、ROSによる細胞毒性の程度を確認した結果、ステムセル・エクソソーム処理群は、oxidative stressに抵抗する優れた抗酸化効果を示しました。

ROSが主な原因である光老化、生物学的老化の改善などの臨床的効果が期待できます。

製剤化されRemyEVの状態になったエクソソームは、in vitroでの試験が難しいため、ヒト臨床試験を行いました。2020年2月10日から4月10日に女性

25人を対象に、RemyEVを5％含有するクリームを朝夕1日2回4週間塗布し、シワや肌の明るさに対しての改善を検証しました。

最終的に個人的理由から4名がドロップアウトし、21名での試験を終了しましたが、シワについては全体の寸法、深さ、幅、最大の深さについて測定し、すべての項目で、統計的有意差をもって改善が確認され、皮膚の明るさについても、肌の明るさを示すL値が有意差をもって改善しました。

頰部位の肌の明るさL*値を分析した結果、適用前に比べて適用2週間後、適用4週間後に、それぞれ0.837%、0.799%統計的有意差(p<0.05)をもって増加しました。

したがって、RemyEVを5％含有するクリームは適用2週間後、適用4週間後、肌の明るさ改善に効果があると判断されました。